操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及*濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(完全培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
公司細胞現(xiàn)貨供應,質量有保證、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供*價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產(chǎn)品名稱
英文名稱
規(guī)格
貨號
甘油三脂(TG)檢測試劑盒(單試劑GPO-微板法)
96T
BJ-01X12188
中文名稱:甘油三脂(TG)檢測試劑盒(單試劑GPO-微板法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:96T
發(fā)貨周期:1~3天
注意事項:
介紹:又稱GPO-酶法或酶,為國內外的方法,甘油三脂被分解成甘油,甘油被甘油激酶及ATP磷酸化,經(jīng)GPO氧化成G3P,再經(jīng)3P反應顯色,酶標儀或全自動生化分析儀500-520nm比色檢測吸光度。 儲存條件:2~8℃,避光,6個月 用途:單試劑GPO-法檢測血清、血漿、組織等樣本的甘油三酯(又稱三酰甘油)含量
介紹:又稱GPO-酶法或酶,為國內外的方法,甘油三脂被分解成甘油,甘油被甘油激酶及ATP磷酸化,經(jīng)GPO氧化成G3P,再經(jīng)3P反應顯色,酶標儀或全自動生化分析儀500-520nm比色檢測吸光度。
儲存條件:2~8℃,避光,6個月
用途:單試劑GPO-法檢測血清、血漿、組織等樣本的甘油三酯(又稱三酰甘油)含量
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-INPPL1(Ser576) 肌醇聚磷酸鹽磷酸樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Laminin Beta 2/Laminin S 層粘連蛋白β2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
AGT 管緊張素原抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml
大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA KitELISA.96T/48T大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
CDK2 周期素依賴性激2抗體 規(guī)格: 0.1ml
MPP9/MPHOSPH9 有絲分裂細胞周期蛋白MPP9抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-GSK3 Beta (Tyr216) 磷酸化葡萄糖合成激3β抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit anti-Pig IgG whole serum 兔抗豬IgG抗清 規(guī)格: 1ml
Phospho-NFKB p65(Ser468) 磷酸化細胞核因子NF-κB p65抗體 規(guī)格: 0.1ml
甘油三脂(TG)檢測試劑盒(單試劑GPO-微板法)Encephalitozoon spp.腦胞內原蟲屬通用·染料法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Nucleophosmin 核仁磷酸蛋白抗體 0.2ml
腰果源性成分PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
Theileria spp.泰勒屬原蟲通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CDK4 周期素依賴性激4抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-FXYD1 (Ser83) 磷酸化磷酸神經(jīng)膜抗體 規(guī)格: 0.1ml
Red Clover Mottle Virus(RCMV)紅三葉草斑點病毒PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周UTS2D 尾加壓素2相關肽抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-SGK1 (Thr256) 磷酸化糖皮質激素調節(jié)激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Cortex cinnamomi肉桂PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周IL-33 白介素33抗體 規(guī)格: 0.1mlIL-15 白介素15抗體 規(guī)格: 0.1ml
Avian Reticuloendotheliosis Virus(REV)禽網(wǎng)狀內皮組織增殖病病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-EGFR (Ser1070) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1mlCKAP4 細胞骨架相關蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Pneumocystis carinii卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周human C3 補體C3抗體 規(guī)格: 0.1mlCD38 CD38抗體 規(guī)格: 0.1ml
Pericarpium citri reticulatae陳皮探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周IQCA1 IQCA1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlGLUT3 葡萄糖轉運蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml
Grass carp reovirus(GCRV)草魚呼腸孤病毒2型RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-NDRG1 (Thr346) 磷酸化分化相關基因NDRG1抗體 規(guī)格: 0.1mlZO-1 胞質緊密粘連蛋白1抗體(閉鎖小帶蛋白1) 規(guī)格: 0.1ml
Giardia intestinalis腸賈第蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周COBLL1 Cordon bleu蛋白樣1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-MEK1/2(Ser218/222) 磷酸化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體 規(guī)格: 0.1ml
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操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及*濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(完全培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
公司細胞現(xiàn)貨供應,質量有保證、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供*價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產(chǎn)品名稱
英文名稱
規(guī)格
貨號
甘油三脂(TG)檢測試劑盒(單試劑GPO-微板法)
96T
BJ-01X12188
中文名稱:甘油三脂(TG)檢測試劑盒(單試劑GPO-微板法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:96T
發(fā)貨周期:1~3天
注意事項:
介紹:又稱GPO-酶法或酶,為國內外的方法,甘油三脂被分解成甘油,甘油被甘油激酶及ATP磷酸化,經(jīng)GPO氧化成G3P,再經(jīng)3P反應顯色,酶標儀或全自動生化分析儀500-520nm比色檢測吸光度。
儲存條件:2~8℃,避光,6個月
用途:單試劑GPO-法檢測血清、血漿、組織等樣本的甘油三酯(又稱三酰甘油)含量
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-INPPL1(Ser576) 肌醇聚磷酸鹽磷酸樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Laminin Beta 2/Laminin S 層粘連蛋白β2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
AGT 管緊張素原抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml
大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA KitELISA.96T/48T大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
CDK2 周期素依賴性激2抗體 規(guī)格: 0.1ml
MPP9/MPHOSPH9 有絲分裂細胞周期蛋白MPP9抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-GSK3 Beta (Tyr216) 磷酸化葡萄糖合成激3β抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit anti-Pig IgG whole serum 兔抗豬IgG抗清 規(guī)格: 1ml
Phospho-NFKB p65(Ser468) 磷酸化細胞核因子NF-κB p65抗體 規(guī)格: 0.1ml
甘油三脂(TG)檢測試劑盒(單試劑GPO-微板法)Encephalitozoon spp.腦胞內原蟲屬通用·染料法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Nucleophosmin 核仁磷酸蛋白抗體 0.2ml
腰果源性成分PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
Theileria spp.泰勒屬原蟲通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CDK4 周期素依賴性激4抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-FXYD1 (Ser83) 磷酸化磷酸神經(jīng)膜抗體 規(guī)格: 0.1ml
Red Clover Mottle Virus(RCMV)紅三葉草斑點病毒PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周UTS2D 尾加壓素2相關肽抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-SGK1 (Thr256) 磷酸化糖皮質激素調節(jié)激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Cortex cinnamomi肉桂PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周IL-33 白介素33抗體 規(guī)格: 0.1mlIL-15 白介素15抗體 規(guī)格: 0.1ml
Avian Reticuloendotheliosis Virus(REV)禽網(wǎng)狀內皮組織增殖病病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-EGFR (Ser1070) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1mlCKAP4 細胞骨架相關蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Pneumocystis carinii卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周human C3 補體C3抗體 規(guī)格: 0.1mlCD38 CD38抗體 規(guī)格: 0.1ml
Pericarpium citri reticulatae陳皮探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周IQCA1 IQCA1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlGLUT3 葡萄糖轉運蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml
Grass carp reovirus(GCRV)草魚呼腸孤病毒2型RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-NDRG1 (Thr346) 磷酸化分化相關基因NDRG1抗體 規(guī)格: 0.1mlZO-1 胞質緊密粘連蛋白1抗體(閉鎖小帶蛋白1) 規(guī)格: 0.1ml
Giardia intestinalis腸賈第蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周COBLL1 Cordon bleu蛋白樣1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-MEK1/2(Ser218/222) 磷酸化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體 規(guī)格: 0.1ml