按照2020版藥典采用GL InertSustain C18色譜柱測(cè)定橙皮苷

原2015版藥典測(cè)定“橙皮苷”色譜條件：

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-醋酸-水（35：4：61）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為283nm。理論板數(shù)按橙皮苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。

#對(duì)照品溶液的制備：

取橙皮苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，即得。

#供試品溶液的制備：

取本品粗粉約1g，精密稱定，置索氏提取器中，加石油醚（60～90℃）80ml，加熱回流2～3小時(shí)，棄去石油醚，藥渣揮干，加甲醇80ml，再加熱回流至提取液無色，放冷，濾過，濾液置100ml容量瓶中，用少量甲醇分?jǐn)?shù)次洗滌容器，洗液濾入同一量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

#測(cè)定法：

分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

2020版藥典測(cè)定“橙皮苷”色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)如下：

#對(duì)照品溶液的制備：

取橙皮苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每 1ml 含 0.2mg 的溶液 ，即得。

#供試品溶液的制備：取本品粗粉（過二號(hào)篩）約 0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇 25 ml，密塞，稱定重量，聲處理（功率 300 W， 頻率：40kHz） 45 分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

#測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

#系統(tǒng)適用性要求：

理論板數(shù)按橙皮苷峰和川陳皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。

色譜條件

色譜柱：InertSustain C18 5μm 250 × 4.6mm（P/N:5020-07346）

流動(dòng)相：乙腈:水(22:78)

流速：1ml/min

柱溫：25℃

檢測(cè)波長(zhǎng)：283nm

進(jìn)樣量：5μl

柱壓：114 bar

儀器型號(hào)：Thermo Ultimate 3000

檢測(cè)器：DAD

實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論

對(duì)照品圖譜：

供試品圖譜：

重現(xiàn)性結(jié)果：

說明：本次實(shí)驗(yàn)按照藥典公示稿要求進(jìn)行，無改動(dòng)。

結(jié)論

橙皮苷按照新2020版含量檢測(cè)方法檢測(cè)，供試品理論塔板數(shù)達(dá)10022，且5次重復(fù)實(shí)驗(yàn)理論塔板數(shù)及保留時(shí)間沒有下降，故Inertsustain C18適合用于2020版藥典陳皮檢測(cè)項(xiàng)下橙皮苷的含量分析。