一、細胞培養(yǎng)的基本概念

    體外培養(yǎng)（in vitro culture）包括所有結(jié)構(gòu)層次的培養(yǎng)，即：組織培養(yǎng)（tissue culture）、細胞培養(yǎng)（cell culture）和器官培養(yǎng)（organ culture）。

細胞培養(yǎng)(Cell culture)指從生物機體取出部分組織分散成單個細胞或直接從機體取出單個細胞，也可把體外培養(yǎng)細胞分散成單個細胞在體外條件下培養(yǎng)，細胞能繼續(xù)存活與增殖。

二、細胞培養(yǎng)目的與用途

1、科學研究

（1）藥物研究開發(fā)，如新藥篩選，疫苗、基因工程藥物、細胞工程藥物研究與開發(fā)、單克隆抗體制備等。

（2）基礎(chǔ)研究，如藥物作用機理、基因功能、疾病發(fā)生機理等研究。

2、生物制藥

（1）疫苗生產(chǎn)：如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)，多肽疫苗（腫瘤疫苗)等。

（2）基因工程藥物生產(chǎn)：如EPO等。

（3）抗體藥物、基因治療藥物生產(chǎn)。

（4）細胞工程藥物生產(chǎn)：生物細胞內(nèi)的一些生物活性多肽，生物活性物質(zhì)等。

（5）利用細胞法體外測定生物活性物質(zhì)的活性；并預測其在體內(nèi)的藥效和替代體內(nèi)法檢測其成品的生物活性。

三、原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)

      原代培養(yǎng)（primary culture）:將動物機體的各種組織從機體中取出，經(jīng)各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養(yǎng)。

但實際上，通常把第yi代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。

傳代培養(yǎng)（subculture）：細胞在培養(yǎng)器皿中生長一定時間后，被分開接種到新的培養(yǎng)器皿中。

    當原代培養(yǎng)*以后，隨著培養(yǎng)時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面也會因營養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長或發(fā)生中毒。此時就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)器皿（瓶）內(nèi)，再進行培養(yǎng)。

對單層培養(yǎng)而言，80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。

四、體外培養(yǎng)細胞的方式

     群體培養(yǎng)（mass culture），將含有一定數(shù)量細胞的懸液置于培養(yǎng)瓶中，讓細胞貼壁生長，匯合（confluence）后形成均勻的單細胞層；

克隆培養(yǎng)（clonal culture），將高度稀釋的游離細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，各個細胞貼壁后，彼此距離較遠，經(jīng)過生長增殖每一個細胞形成一個細胞集落，稱為克?。╟lone）。一個細胞克隆中的所有細胞均來源于同一個祖先細胞。